C6TSEDRVAJZ小分子化合物组合诱导人胎盘成纤维细胞分化为上皮样细胞

C6TSEDRVAJZ,a combination of small-molecule compounds,induces differentiation of human placental fibroblasts into epithelioid cells in vitro

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摘要目的利用小分子化合物组合将人胎盘成纤维细胞(HPFs)重编程为化学诱导上皮样细胞(ciEP-Ls).方法常氧条件下培养HPFs细胞,通过免疫荧光、PCR和染色体核型分析鉴定HPFs.生理性低氧条件下(37℃,5%O2),HPFs在含有小分子化合物C6TSEDRVAJZ(CHIR99021、616452、TTNPB、SAG、EPZ5676、DZNep、Ruxolitinib、VTP50469、Afuresertib、JNK-IN-8、EZM0414)的培养基中进行诱导,诱导期间每日定时观察细胞形态.通过免疫荧光法、Western blotting和PCR技术检测上皮细胞标志物的表达水平.对诱导细胞进行染色体核型分析,并计算诱导效率.结果 HPFs免疫荧光结果显示,表达成纤维表面标记物CD34和Vimentin,不表达上皮表面标志物;PCR结果显示,成纤维特异性基因S100A4、COL1A1高表达,且具有人正常二倍体核型.在低氧条件下诱导1 d后,部分HPFs细胞形态发生改变,由多突的纺锤形变成圆形或多边形,具有ciEP-Ls形态特征.诱导处理完成第4天,免疫荧光和Western blotting结果显示,诱导细胞能够高表达上皮细胞特征性标志物E-Cadherin和Lin28A(P<0.05).PCR结果表明,细胞显著表达上皮标志物Smad3,GLi3,PAX8,WT1,KRT19和KRT18,而成纤维细胞表面标记物表达均下调,且诱导细胞具有人正常二倍体核型,HPFs重编程效率为(64.53±2.80)%～(68.10±3.60)%.结论小分子组合C6TSEDRVAJZ在低氧条件下成功将HPFs诱导为ciEP-Ls,且具有较高的诱导效率.

作者 代振佳 ^[1] 高群伟 ^[1] 应梦娇 ^[1] 王澳 ^[1] 洪娟 ^[1] 王春景 ^[2] 郭俣 ^[3] 刘长青 ^[2] 刘高峰 ^[2] 学术成果认领

作者单位 蚌埠医科大学生命科学学院,安徽蚌埠 233000 ^[1] 蚌埠医科大学生命科学学院,安徽蚌埠 233000;蚌埠医科大学安徽省神经再生技术与医用新材料工程研究中心,安徽蚌埠 233000 ^[2] 蚌埠医科大学生命科学学院,安徽蚌埠 233000;蚌埠医科大学检验医学院,安徽蚌埠 233000 ^[3]

关键词化学重编程小分子诱导成纤维细胞上皮样细胞 chemical reprogramming small molecule induction fibroblasts epithelioid-like cells

栏目名称

基础研究

DOI 10.12122/j.issn.1673-4254.2025.02.13

发布时间 2025-03-14