摘要目的 基于网络药理学探讨调周滋阴方治疗早发性卵巢功能不全(POI)的作用机制,通过动物实验进行验证,并设计临床对照试验验证调周滋阴方对该病的临床疗效.方法 利用TCMSP、PubChem、Swiss Target Prediction、Genecards、OMIM等数据库筛选相应靶点,获取核心PPI,进行GO、KEGG富集分析,构建"疾病-通路-靶点-成分-药物"网络,采用AutoDock对核心活性成分和核心靶点进行分子对接验证.通过动物实验,采用Western blotting进一步验证网络药理学结果.设计临床对照试验,对照组予芬吗通治疗,试验组在此基础上加用调周滋阴方,通过观察两组内分泌指标(FSH、LH、E2、AMH)、窦卵泡数、Kupperman评分、不良反应发生率及妊娠率,验证调周滋阴方治疗该病的临床有效性.结果 通过网络药理学方法,得到调周滋阴方治疗早发性卵巢功能不全的潜在靶点有163个;核心活性成分主要为山奈酚、β-谷甾醇、木犀草素、槲皮素,核心靶点主要为SRC、TP53、STAT3、PIK3CA、MAPK3等;GO功能富集主要包括细胞运动的正调控、蛋白质磷酸化等;KEGG富集通路主要包括癌症通路、PI3K-Akt信号通路等;分子对接结果显示核心活性成分与核心靶点间均有良好的结合能力.利用动物实验对关键通路进行验证,结果显示,与POI模型组大鼠比较,调周滋阴方可升高POI大鼠卵巢组织中p-PI3K和p-Akt蛋白表达(P<0.05),验证了网络药理学的部分预测结果.临床试验显示,两组E2较治疗前升高,FSH、LH较治疗前降低,Kupperman评分较治疗前降低(P<0.05),且试验组优于对照组(P<0.05);两组窦卵泡数较治疗前均升高(P<0.05),试验组AMH较治疗前升高(P<0.05),试验组与对照组间的差异无统计学意义(P>0.05);治疗结束4周后,试验组治疗效果优于同期对照组(P<0.05).结论 调周滋阴方具有多成分、多靶点、多途径的治疗特点,其中激活PI3K/Akt通路是其作用机制之一,从而改善POI患者卵巢储备功能,缓解临床症状,提高临床疗效,具有良好的临床应用前景.