摘要目的 研究石斛合剂通过Sirt3介导的线粒体自噬通路改善糖尿病心肌病的作用机制.方法 将40只雄性SPF级SD大鼠分为对照组、模型组、二甲双胍组、石斛合剂组(n=10).对照组用生理盐水灌胃,其它组用高脂高糖饮食喂养12周和1.0%链脲佐菌素(25 mg/kg)腹腔注射后,模型组用生理盐水继续灌胃,二甲双胍组则用二甲双胍溶液(100 mg·kg-1·d-1)灌胃,石斛合剂组用石斛合剂溶液(16.7 g·kg-1·d-1)灌胃,持续干预4周.给药期间监测空腹血糖和心重指数,应用比色法检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;酶联免疫法检测脑钠肽(BNP)、C反应蛋白(CRP)、α-肿瘤坏死因子(TNF-α)、介素-6(IL-6)的水平;HE及Masson染色观察心脏组织病理改变;应用透射电镜观察心肌细胞的线粒体及自噬体的超微结构;RT-PCR实验检测Sirt3、FoxO3a、PINK1、Parkin、P62、LC3的基因表达水平;Western blotting和免疫组化法检测Sirt3、FoxO3a、p-FoxO3a、PINK1、Parkin、LC3、P62的蛋白表达水平.结果 与对照组相比,模型组、二甲双胍组和石斛合剂组的空腹血糖、心重指数明显升高(P<0.01),大鼠血清中TC、TG、LDL-C、LDH、CRP、BNP和心肌组织中的TNF-α、IL-6含量显著增加(P<0.01),HDL-C显著降低(P<0.01),心肌纤维排列紊乱,线粒体肿胀溶解,Sirt3、FoxO3a、PINK1、Parkin、LC3的基因表达水平明显下降、P62表达水平升高(P<0.05);Sirt3、p-FoxO3a/FoxO3a值、PINK1、Parkin、LC3的蛋白表达水平显著降低,P62蛋白水平升高(P<0.05).与模型组相比,石斛合剂组能显著降低空腹血糖水平和心重指数(P<0.01),同时降低LDH、CRP、BNP、TNF-α、IL-6的含量及TC、TG、LDL-C的水平(P<0.01),升高HDL-C的水平(P<0.01),抑制心肌纤维化,修复线粒体、促使自噬体产生,上调线粒体自噬基因Sirt3、FoxO3a、PINK1、Parkin、LC3(P<0.01),下调P62的基因表达水平(P<0.01),同时升高Sirt3、PINK1、Parkin、LC3蛋白水平和p-FoxO3a/FoxO3a比值(P<0.05),降低P62的蛋白水平(P<0.01).石斛合剂与二甲双胍组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 石斛合剂可能通过Sirt3调节线粒体自噬途径改善糖尿病心肌病的组织损伤及线粒体功能.