加味清心莲子饮通过调控KDM3C/SP1信号通路改善糖尿病肾病小鼠的肾脏损伤
Jia Wei Qingxin Lotus Seed Drink improves diabetic kidney disease in mice by regulating the KDM3C/SP1 signaling pathway
摘要目的 探讨加味清心莲子饮(QISD)对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾脏损伤的干预作用及机制.方法 从GEO数据库中下载GSE193192数据集,筛选由晚期糖基化终末产物诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)中差异表达的免疫基因集,利用多种分析预测药理机制.动物实验方面,选用雄性ICR小鼠,先持续性高脂饮食喂养4周后,连续腹腔注射链脲佐菌素5 d,制备DKD模型,连续灌胃低(14.46 g/kg)、中(28.92 g/kg)、高剂量(57.84 g/kg)的加味清心莲子饮12周(1次/6),以达格列净作为阳性对照,8只/组.通过HE、PAS和Masson染色观察DKD小鼠肾脏病理损伤.通过RT-qPCR和Western blotting检测KDM3C、SP1、TNF-α、MCP-1等蛋白的表达水平.在体外实验中,使用脂多糖(LPS)诱导HK-2发生炎症损伤,采用小分子抑制剂干预的方法,探索加味清心莲子饮对细胞炎性损伤的影响.结果 动物实验结果表明,加味清心莲子饮中剂量组和高剂量组能够显著降低糖尿病肾病小鼠糖化血清蛋白、肌酐和尿素氮水平(P<0.01,P<0.001),减少糖原累积,减轻肾小球肥大,降低炎性细胞浸润.此外,加味清心莲子饮中剂量组和高剂量组能够显著降低小鼠肾脏组织中KDM3C、SP1、TNF-α和MCP-1的基因和蛋白表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001).细胞实验结果显示KDM3C抑制剂JIB-04的应用则能抑制TNF-α、MCP-1和ICAM-1等炎性因子的表达水平(P<0.05,P<0.001).结论 加味清心莲子饮可通过抑制糖尿病肾病小鼠的炎症反应改善肾脏损伤,其作用机制可能与抑制KDM3C/SP1信号通路的过度激活有关.
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