摘要目的 基于鼠p53-双微体基因2(MDM2)信号轴探讨健脾滋肾方对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠肾损害铁死亡的影响和治疗作用.方法 30只SPF级MRL/lpr狼疮鼠采用随机对照表法分为模型(Model)组、健脾滋肾方(JPZS)组、泼尼松(Pred)组.另取10只C57BL/6小鼠为正常对照(Control)组.健脾滋肾方组予以JPZS悬液7.8 g·kg-1·d-1、泼尼松组予以泼尼松悬液5 mg·kg-1·d-1,正常对照组及模型组予生理盐水17.5 mL·kg-1·d-1,灌胃给予相应剂量药物,连续用药8周后取材监测.酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清抗双链DNA抗体(anti-ds DNA);自动生化分析仪检测补体3(C3)、血肌酐(Scr);考马斯亮蓝(CBB)法检测24 h尿蛋白(24 hPRO)含量;比色法检测肾组织铁离子(Fe2+)含量;硫代巴比妥酸法(TBA)检测丙二醛(MDA)、WST-1法测定超氧化物歧化酶(SOD)、微板法测定微量还原型谷胱甘肽(GSH)水平;流式检测肾组织ROS水平;组织病理学染色(HE、Masson、PAS)法观察肾组织病理学改变及定量分析;透射电子显微镜下观察肾脏足细胞线粒体形态变化;实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测p53、MDM2、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、长链酰基辅酶A合成酶4(ACSL4)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤2蛋白(Bcl-2)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)mRNA的表达情况.蛋白质印迹法检测GPX4、SLC7A11、ACSL4、Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白的表达情况.结果 与Control组相比,Model组dsDNA、Scr、24hPRO、Fe2+、MDA、ROS水平、p53、MDM2 mRNA表达水平、ACSL4、Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),C3、SOD、GSH水平、GPX4、SLC7A11、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平显著下降(P<0.05);与Model组相比,JPZS、Pred组dsDNA、Scr、24hPRO、Fe2+、MDA、ROS水平、p53、MDM2 mRNA表达水平、ACSL4、Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),C3、SOD、GSH水平、GPX4、SLC7A11、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01).结论 健脾滋肾方能够明显降低狼疮小鼠肾组织铁死亡水平,改善肾损害、修复肾功能,其机制或与抑制p53-MDM2信号轴有关;结合足细胞线粒体超微结构异常呈一致性改变,这一过程可能与肾小球足细胞相关的铁死亡损伤密切相关.