上皮生长因子对鼠肺细胞动力学的调节及其对放射保护的意义(Ⅰ)
Modulating Effect of Keratinocyte Growth Factor on Cellular Kinetics of Murine Lung(Ⅰ)
摘要背景与目的:上皮生长因子 (keratinocyte growth factor, KGF)引起肺Ⅱ型细胞增殖 ,并保护肺免受外界多种刺激.以往,对慢反应正常肺组织的动力学参数难以测定 ,然而,近年来发展的技术使得准确测定正常组织细胞动力学指标成为可 能.BrdUrd掺入 DNA后 ,用流式细胞仪分析可测定组织中细胞的增殖状况,本研究的目的是采用上皮生长因子刺激后,探讨鼠肺正常组织细胞增殖动力学改变的情况.方法:采用 KGF(5 mg/kg) 或生理盐水 C3Hf/Kam 小鼠气管内注射 ,并分别在 0, 1, 2, 3, 4, 5, 及 7天予以处死,处死前 20分钟或 6小时,腹腔内给予 BrdUrd (60 mg/kg),肺组织切下后 ,固定于 60% 酒精 , 经消化处理形成单个细胞核 , 在流式细胞仪分析前行 BrdUrd 及总 DNA 含量标记染色 ,计算出标记指数 (LI), 细胞 S期时间 (TS)及倍增时间 (Tpot)等细胞动力学参数;免疫荧光染色技术用于鉴定增殖细胞的类型.结果:(1)建立了上皮生长因子 (5 mg/kg)刺激肺Ⅱ型细胞增殖的方法及气管内给药的途径;(2)肺组织 LI 由正常值 0.5% 升至给药后第三天的 5.5% , 第七天回至正常;(3)细胞 Tpot由 75.5天降至 4.7 天;生理盐水治疗组增殖参数没有变化.结论:上皮生长因子可引起肺Ⅱ型细胞的增殖 ,主要表现为 LI的升高及 Tpot降低.这种增殖效应短暂 , 第七天回至正常.这为进一步将 KGF作为肺肿瘤放疗的放射保护剂研究打下理论基础.
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