摘要背景与目的:EB病毒核抗原1(Epstein-Barr viral nuclear antigen 1,EBNA1)对于维持EB病毒的潜伏感染有重要作用.V-val变异型的EBNAl与鼻咽癌有密切的相关性.本研究旨在比较原型和V-val变异型的EBNAl基因在上皮细胞中的功能的差异.方法:用PCR方法扩增出原型和V-val变异型EBNA1基因的全长并克隆到pGFP载体上,转染HEK293细胞,检测两种亚型的EBNA1蛋白的表达对细胞生物学性状的影响.以含有EB病毒增强子FR序列的荧光素酶载体作为报告基因.比较两种亚型的EBNA1基因对质粒的转录激活能力.结果:原型和V-val变异型EBNA1基因的表达对HEK293细胞的生长速度没有明显影响,但表达原型EBNA1的细胞的克隆形成能力明显低于V-val亚型.在裸鼠致瘤实验中,接种表达原型和V-val变异型EBNA1细胞的实验组均未见肿瘤形成.但是在瞬时转染实验中,表达V-val变异型EBNA1基因的HEK293细胞的荧光素酶活性明显高于原型EBNA1基因.结论:原型和变异型EBNA1均未发现有明显的转化细胞的能力,但是V-val变异型EBNA1蛋白与原型相比,其转录激活的功能明显增强.
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