Ad-ING4对人前列腺癌细胞PC-3体内外抑癌效应的研究

In vitro and in vivo inhibitory effect of Ad-ING4 gene on proliferation of human prostate cancer PC-3 cells

二维码有效期 120s

摘要背景与目的:腺病毒作为载体已被广泛用于肿瘤的基因治疗.ING4是生长抑制因子家族中的一个成员,是一种潜在的抑癌基因.本研究旨在探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-ING4)对人前列腺癌细胞PC-3的体内外抑癌效应及其分子机制.方法:将扩增的Ad-ING4重组腺病毒感染PC-3细胞,用RT-PCR法检测ING4在PC-3细胞中的转录;MTT法检测ING4基因对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞术和Hoechst33258染色法检测细胞凋亡的变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因的表达对PC-3细胞中的bcl-2、bax、p53和caspase-3凋亡相关基因表达的影响.用Ad-ING4重组腺病毒在裸鼠PC-3移植瘤的瘤体内注射治疗,观察肿瘤生长变化,15 d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重:用免疫组化法检测瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和CD34蛋白的表达.结果:腺病毒介导的人ING4基因在PC-3细胞中成功转录,明显抑制PC-3细胞增殖,上调p53、bax、caspase-3基因表达和下调bcl-2基因表达,并诱导细胞凋亡.Ad-ING4重组腺病毒能显著抑制裸鼠PC-3移植瘤的生长,瘤重的抑制率达37%,与空病毒载体Ad-GFP 组和细胞对照PBS组比较差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化结果显示Ad-ING4重组腺病毒能明显上调Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,下调Bcl-2和CD34蛋白的表达水平.结论:腺病毒介导的ING4基因在体内外均可明显抑制人前列腺癌细胞PC-3的生长,诱导其凋亡,其机制可能是上调P53、Bax、Caspase-3蛋白和下调Bcl-2蛋白表达水平.