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新型鸭呼肠孤病毒σB和σC蛋白间接ELISA方法的建立

Development of Indirect ELISA for Detecting Novel Duck Reovirus UsingσB andσC Proteins as Coating Antigens

摘要以纯化的新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)NP03株重组σB 和σC 蛋白作为包被抗原,对反应条件进行优化,建立检测 NDRV抗体的间接 ELISA方法。优化后的最佳条件为:σB 蛋白包被浓度为12.5μg · mL-1;σC蛋白包被浓度为6.25μg·mL-1;封闭液为15% FBS;血清稀释度为1∶80;酶标二抗稀释度为1∶400;底物37℃显色5 min。该方法对 MDRV、DHV、MPV 和 MD-GPV 阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性。该方法与 NDRV全病毒间接 ELISA相比较,符合率高达92.5%。本研究进一步丰富了 NDRV抗体的检测方法。

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