换一批
换一批猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的制备及特性分析
Preparation and Characterization of Monoclonal Antibodies Against Porcine Epidemic Diarrhea Virus
摘要为制备猪流行性腹泻病毒(PDEV)的单克隆抗体,并鉴定单克隆抗体特性.本试验采用差速和蔗糖梯度离心纯化PEDV抗原,免疫Balb/c小鼠,将免疫鼠的脾细胞与SP2/0细胞进行融合,经ELISA方法筛选和细胞克隆,得到能分泌鼠抗PEDV单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备出相应的单克隆抗体,并分析其特性.试验结果:获得2株能稳定分泌抗PEDV的单克隆抗体,命名为E1和H6株,其中E1单隆抗体为IgG2a亚型,H6单隆抗体为IgM亚型,2株单克隆抗体均具有IFA、ELISA和Western bloting特性.E1杂交瘤细胞株的细胞上清液和腹水的ELISA抗体效价分别26和105,H6杂交瘤细胞株的细胞上清液和腹水的ELISA抗体效价分别24和104.2株单克隆抗体与Vero细胞、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)均无交叉反应.Western bloting测定结果表明,E1株单克隆抗体能识别PEDV的M蛋白,H6单克隆抗体能识别PEDV的N蛋白.PEDV单克隆抗体的成功研制,为PEDV免疫诊断、表位识别及蛋白研究奠定了良好基础.
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分类号
S852.65
栏目名称
动物科学
DOI
10.19303/j.issn.1008-0384.2017.08.002
发布时间
2018-01-03
基金项目
福建省自然科学基金项目
福建省科技创新平台建设项目
福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项
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