猪流行性腹泻病毒E基因原核表达载体的构建
Construction of prokaryotic expression vector of porcine epidemic diarrhea virus E gene
摘要目的:通过构建猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)E基因原核表达载体pET-E,为后续探讨E基因的原核表达以及功能研究奠定基础.方法:将PEDV E基因通过PCR方法进行扩增,PCR产物经凝胶电泳检测后,用试剂盒纯化回收目的片段,将胶回收产物与表达载体pET-32a连接后,转化入Trans BL21(DE3)感受态细胞中,挑取单菌落,摇菌培养过夜,提取质粒,用双酶切鉴定阳性载体.结果:成功扩增大小为 231 bp的目的片段,构建了PEDV E基因原核表达载体.结论:本研究成功构建了PEDV E基因原核表达载体,为下一步进行E基因原核表达以及进一步研究PEDV E基因的功能奠定基础.
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