间接免疫荧光检测猪瘟活疫苗效价方法的优化和应用
Optimization and application of an indirect immunofluorescence assay for potency testing of classical swine fever live vaccine
摘要为建立高效特异的猪瘟病毒(CSFV)含量检测方法,本研究对传统间接免疫荧光法(IFA)进行优化,重点评估聚乙二醇10000(PB)和TritonX-100 对检测灵敏度的协同增效作用.试验设A组(添加PB+TritonX-100)、B组(添加PB)、C组(添加TritonX-100)、D组(传统IFA).结果显示:A组荧光强度高于B组、C组、D组,因此,选择A组的优化方案.选择三批半成品(BS2025001-3)1~8 收次抗原,平行进行优化IFA与兔体感染量(RID)检测,两种方法均显示 2~5 收次效价持续上升(≥50 万RID/mL),第 5 收次达到峰值后第 6 收次显著下降(降幅>40%).因此,建议生产实践中选择 2~5 收次抗原进行配苗.
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