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低表达组氨酸三聚体核苷结合蛋白2对人正常结直肠黏膜细胞迁移能力的影响及机制研究

摘要目的 研究组氨酸三聚体核苷结合蛋白2(histidine triad nucleotide binding protein 2,HINT2)及上皮钙黏素(E-cadherin,CDH1)在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)组织中的表达,下调HINT2对人正常结直肠黏膜细胞(FHC)的迁移能力的影响及机制.方法 获取UC患者的病变及正常结肠组织,检测HINT2及E-cadherin的mRNA和蛋白表达.下调FHC细胞株中的HINT2的表达水平,Transwell实验及划痕实验检测细胞的迁移能力,Western blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)信号通路蛋白的表达水平变化.结果 UC组织中的HINT2与CDH1的表达降低.在Transwell实验中,低表达HINT2组细胞的穿膜细胞数多于对照组细胞,低表达HINT2+高表达miRNA-200c组与对照组之间穿膜细胞数差异无统计学意义;划痕实验结果显示低表达HINT2组细胞的划痕缩小距离比对照组长,低表达HINT2+高表达miRNA-200c组与对照组之间划痕缩小距离差异没有统计学意义.Western blot提示低表达HINT2组FHC细胞中CDH 1表达降低,而钙粘素2(CDH2)、波形蛋白基因以及锌指蛋白1(ZEB1)表达升高.结论 HINT2和CDH 1在UC组织中低表达,在FHC中低表达HINT2通过抑制miR-200c上调ZEB1,进而激活EMT通路,致FHC细胞的迁移能力增强.

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