换一批抗辐射菌Deinococcus radiodurans的DNA结合蛋白的检测及分析
Detection and analysis of DNA-binding proteins from the radioresistantbacterium Deinococcus radiodurans
摘要抗辐射菌Deinococcus radiodurans是微小球菌属的一种,它对电离辐射、紫外线及其他的化学诱变剂所诱导的DNA损伤都具有极强的修复能力,故倍受放射生物学界的关注.本研究旨在检测抗辐射菌的DNA结合蛋白(DNA --Binding Protein, DBP),并有选择地对其氨基酸序列加以分析,以进一步研究DBP在抗辐射菌的辐射抗性中的作用和意义.主要研究方法:分离提取抗辐射菌染色体DNA并用地高辛(DIG)加以标记,作为探针;超声波破碎菌体,高速离心制备蛋白提取物,SDS-PAGE用于蛋白质电泳,South-westernblotting(碱性磷酸酶标记的酶联免疫技术)检测DBP.结果表明,在野生型的抗辐射菌中,检测到了8种DBP,分子量分别为122、93、33、29、16、15、14 和12kDa,其中93kDa和33kDa的两种DBP的表达水平随培养基和培养时间的变化而变化.N-末端氨基酸序列测定表明,经FASTA和BLAST文库检索,这两种DBP和已知的其他蛋白质均没有同源性,即该两种DBP为新的蛋白质.由此得出结论,抗辐射菌的DBP在数量上和氨基酸序列的结构上都与其他细菌不同,推测DBP特别是93kDa和33kDa两种新发现的DBP与抗辐射菌的辐射抗性有密切关系.
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关键词
Denococcus radioduransDNA结合蛋白氨基酸序列分析Deinococcus radioduransDNA-bindingproteinsAmino-acid sequencing
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-3436.2000.01.008
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中国核工业总公司资助项目（(J94Q62068)）
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