换一批
换一批L-乙酰半胱氨酸对映体的手性荧光衍生化高效液相色谱法分析
Analysis of Acetylcysteine Derivatized with Fluorescent Chiral Reagent by High Performance Liquid Chromatography
摘要以R-(-)/S-(+)-4-N,N-二甲基磺酰胺-7-(3-异氰酸吡咯烷)-2,1,3-苯并氧杂咪唑[R-(-)/S-DBD-PyNCS]为荧光手性衍生化试剂,用反相高效液相色谱法(RP/HPLC)对乙酰半胱氨酸(NAC)对映体进行分析.在含有1%吡啶溶液中,50 ℃下衍生化反应60 min,生成具有荧光特性的NAC非对映体衍生物,其结构用质谱(MS)表征.该衍生物在流动相为25 mmol/L磷酸钾缓冲溶液(pH 5.9)-甲醇(体积比50 : 28),流速1 mL/min 时,在ODS HYPERSIL C18(200 mm×4.6 mm,5 μm) 色谱柱上进行分离,并在荧光检测器(λex=450 nm,λem=550 nm)上检测.L-NAC在0.4 ～40 mg/L范围内与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=2.716×104X+2.959×106,r=0.999 8,检出限(S/N=3)为0.4 ng.该方法可用于乙酰半胱氨酸制剂含量的测定.
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