高效液相色谱串联质谱法测定中药注射剂对P815细胞脱颗粒后上清液中组胺含量
Determination of Histamine in the Supernatant of Traditional Chinese Medicine Injection on Degranulation in P815 Cells by High-performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry
摘要建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测P815细胞脱颗粒后上清液中组胺含量的方法.采用C18柱(4.6 mm×100 mm,3.5 μm)进行分离,以体积比为60∶40的乙腈-0.5 mmol/L乙酸铵溶液(含0.3%甲酸)为流动相,流速0.4 mL/min;在电喷雾正离子化模式下,采用多离子反应检测方式(MRM)进行检测;检测离子对为m/z 112 >95、112 >68.在优化条件下,样品可在6 min内完成分析,细胞液中组胺在4.0~128.0μg/L范围内线性关系良好(r2 =0.997 9).定量下限(S/N> 10)为1.2μg/L,检出限(S/N=3)为0.3μg/L.在加标水平为16、64、128 μg/L时,细胞上清液中组胺的平均回收率为90% ~ 94%,相对标准偏差(n=6)为4.1%~5.9%.该方法简便、灵敏、重复性好,可用于中药注射剂对P815细胞脱颗粒后上清液中组胺含量的测定.
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