换一批摘要利用肽配体库技术(CPLL)研究了蛋清中的低丰度蛋白质组.考察了盐浓度和洗脱顺序差异对CPLL富集效率的影响.结果表明:盐浓度越高,蛋清蛋白质溶液的离子相互作用越强.利用洗脱溶液解离差异,采用先HOS(有机水溶液)后尿素CHAPS(3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸内盐)的洗脱顺序,溶菌酶能够得到高效分离.保持蛋清的原pH 8.8, 25 mmol/L KH2PO4,150 mmol/L NaCl,尿素CHAPS洗脱,是CPLL提供高效富集的前提.通过分析CPLL富集前后的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)条带差异,采用线性离子阱(LTQ)质谱在蛋清中检出45种低丰度蛋白质,其中两种未见报道.对蛋清中低丰度蛋白质亚细胞的定位分析发现,蛋清蛋白质的分泌蛋白居多.研究结果表明,CPLL技术能够实现蛋清中低丰度蛋白质的高效富集,分析深度达到亚细胞水平.
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关键词
鸡蛋清肽配体库低丰度蛋白质线性离子阱chicken egg whitecombinatorial peptide ligand libraries(CPLL)low-abundance proteinslinear ion trap quadrupole (LTQ)
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DOI
10.3969/j.issn.1004-4957.2015.11.008
发布时间
2015-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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