换一批摘要针对糖组学分析面临的初始样本量需求较高的技术挑战,该研究发展了一种微量样本 N-糖链制备技术(GPAT),通过在移液枪头(Tip)中分别装填 C 18和 HILIC填料,实现了一站式原位蛋白消化、N-糖链释放和富集.与目前普遍采用的基于过滤辅助样品制备(FASP)技术的 N-糖组分析策略相比,使用 GPAT技术可以实现微量免疫球蛋白 G(IgG)和人肝癌 HepG2细胞提取蛋白的原位 N-糖链的释放和富集,样本起始量减少90％,可以从10μg IgG和10μg的HepG2细胞蛋白中分别检测到20条和39条N-糖链.从6例健康人(3例男性,3例女性)尿液中提取的10μg尿蛋白中检测到49条N-糖链.该方法实现了微量复杂蛋白样本 N-糖链简便、快速的定量分析策略,为进一步的糖组学方法推广应用奠定了基础.
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分类号
O657.6
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DOI
10.3969/j.issn.1004-4957.2019.12.002
发布时间
2020-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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