换一批同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中孕酮
Determination of Progesterone in Human Serum Using Isotope Dilution Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry
摘要建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定人血清中孕酮的分析方法.血清样品经乙酸乙酯、正己烷液液萃取(LLE)后,采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)进行梯度分离,色谱运行时间为5 min,采用电喷雾(ESI)正离子电离模式和多反应监测(MRM)扫描模式,同位素内标法定量.考察了两步萃取法对孕酮的提取效果,不同流动相的分离效果以及样品稳定性,结果表明以甲醇-0.1％氨水溶液为流动相时分离效果较好.优化条件下,孕酮在10～10 000 pg/mL范围内线性关系良好(r2=0.999 8),方法检出限和定量下限分别为5、10 pg/mL;平均加标回收率为91.5％～106％,日内相对标准偏差(RSD)为1.2％～8.2％,日间RSD为4.1％～9.1％.采用该方法对30个真实血清样品进行测定,孕酮质量浓度为0.050 2～1.363 5 ng/mL,均在正常生理范围内.该方法灵敏度高、准确可靠,可用于临床血清样品中孕酮生理水平的检测.
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1004-4957.2020.05.014
发布时间
2020-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81772259）
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