基质辅助激光解吸附电离-飞行时间串联质谱研究重组人促红细胞生成素一级结构
Primary Structure Determination of Recombinant Human Erythropoietin by Matrix-assisted Laser Desorption Ionization-time of Flight-time of Flight-Mass Spectrometry
摘要建立了生物质谱研究rhEPO 一级结构的系列方法,包括分子量、唾液酸含量以及N-糖含量等糖基化性质的测定方法,并用于4种国产rhEPO 样品的分析;在此基础上优化酶切条件,使测定的肽质量指纹谱(PMF)的覆盖率均达到98%,成功鉴定了4个样品中的全部N-糖基化位点以及对分子中两对二硫键进行了结构确证,测定4个样品分子量分别为:27754.1±27.4Da、27941.4±23.2 Da、27682.5±22.0 Da和27914.7±22.5 Da;唾液酸含量分别为:5.0%、4.8%、5.6%和5.4%;糖含量分别为:34.3%、34.7%、34.1%和34.6%.此外还对4种产品在O-连接糖型及N-连接糖型上的区别做了初步探讨.
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