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高灵敏纳米金比色芯片检测乙型肝炎病毒DNA及其变异

A Visual DNA Microarray for High Sensitivity Detection of Hepatitis B Virus DNA and Single Nucleotide Polymorphisms

摘要构建了新型纳米金比色芯片,利用Taq DNA连接酶的连接特异性,将其与乙型肝炎病毒DNA( HBV-DNA)靶序列完全互补杂交的捕获探针(固定在芯片上)和纳米金修饰的探针连接成一条链,从而将纳米金颗粒固定到芯片点阵上,再通过银染反应放大,形成裸眼可见的显色信息.通过点阵的位置及灰度,即可判断HBV-DNA靶序列的单碱基突变,并得出相对定量信息.本实验对不同浓度的HBV-DNA靶序列进行了检测.结果显示:此技术对单碱基突变有很强的特异性识别能力,并且具有较高的灵敏度(约10 pmol/L),在10~100 pmol/L浓度范围内表现出较好的线性关系.该技术检测时间短(<1 h)、操作简单、不需要特殊的检测设备,具有很好的临床应用前景.

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