摘要建立了一种基于微流控滑移芯片的反应微阵列体系,并应用于双浓度梯度研究.在此反应微阵列芯片中,两种试剂分别通过芯片进样形成多级浓度梯度,进一步在正交方向上形成双浓度梯度的微反应阵列,经过滑动、接触和混合,简便实现多路反应.采用不同色素和荧光染料对系统进行了表征,确认了方法的可靠性,在此基础上,考察了β-半乳糖苷酶(β-gal)的反应条件.将45 nmol/L β-gal和45 μmol/L底物荧光素二半乳糖苷(FDG)分别注入芯片上下层,在芯片通道中各自形成浓度梯度,滑移后进行不同酶浓度和不同底物浓度的反应测定.结果表明,随着底物浓度的提高,反应产物逐渐增多;一定底物浓度下,产物随酶浓度升高而逐渐增多,但很快到达平台期.芯片上酶与底物的浓度对反应的影响与芯片外基本一致.此芯片具有结构简单、操作简便和消耗低等特点,适用于多因素和多水平的复杂反应分析.
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