换一批
换一批摘要利用天冬氨酸转氨酶(A spA T)和L-天冬氨酸α-脱羧酶(PanD)偶联,以富马酸和氨作为底物催化合成β-丙氨酸(β-A la)是工业合成β-丙氨酸的重要途径.但传统的双酶工艺需要分别发酵两个酶,且酶无法固定化.通过将AspAT和PanD构建入同一个大肠杆菌中,使其通过一次发酵就能产生两个酶,并且通过固定化通透细胞使酶可以重复利用.构建的工程菌的整体酶活为85.4U/g,固定化率为64.2％,固定化细胞最适反应温度为45℃,最适反应p H为7.5,最高可将质量浓度为300 g/L的富马酸完全转化生成β-A la,固定化细胞可连续使用12次.根据笔者提出的方法可简化酶的发酵工艺,进一步降低β-A la的生产成本.
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