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低体积PCR扩增用于单细胞分离和检验

Low Volume Amplification in Single Cell Separation and Inspection

摘要目的 优化在单细胞分离检验中应用0.2 mL试管做低体积扩增载体的最佳反应条件.方法 制备理想口腔上皮细胞悬液,用0.2 mL试管分别收集捕获到的5、10个细胞,设置蛋白酶K添加、PCR反应金牌酶用量、循环次数3组条件,用Identifiler(R) Plus试剂盒进行复合扩增,比较各组的检出率、等位基因丢失率和非特异性扩增情况.结果 用0.2mL试管做低体积扩增中,加蛋白酶K裂解、PCR反应金牌酶0.4 μL、PCR反应32个循环,这3个条件的检出率较高,等位基因丢失率较低. 结论 在单细胞分离检验中采用0.2 mL试管进行低体积扩增,可以作为芯片-低体积扩增的有效补充手段.

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作者 韩俊萍 [1] 李彩霞 [2] 严红 [3] 朱典 [4] 李艮平 [4] 胡兰 [2] 学术成果认领
作者单位 中国人民公安大学,北京,100038 [1] 公安部物证鉴定中心,北京100038;法医遗传学公安部重点实验室,北京100038 [2] 公安部物证鉴定中心,北京,100038 [3] 重庆医科大学,重庆,400016 [4]
分类号 DF795.2
栏目名称
DOI 10.3969/j.issn.1004-5619.2012.02.012
发布时间 2012-08-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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法医学杂志

法医学杂志

2012年28卷2期

123-125页

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