miR-20a过表达促进VEGF表达及血管平滑肌细胞活性和迁移

Overexpression of miR-20a promotes VEGF expression and vascular smooth muscle cell activity and migration

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摘要目的探讨miR-20a过表达对血管内皮生长因子(VEGF)表达及血管平滑肌细胞(VSMC)活性和迁移的影响,并初步探索其可能的机制.方法将miR-20a mimics转染至VSMC,VSMC分为3组:空白对照(Con)组、阴性对照(miR-NC)组和转染(miR-20a)组.Real-time PCR检测miR-20a的表达变化,Real-time PCR和Western blot检测各组VSMC中VEGF的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组VSMC活性变化,Transwell实验检测各组VSMC迁移能力,生物信息学和荧光素酶报告基因实验分析miR-20a对CNN1的靶向关系.结果与miR-NC组比较,转染miR-20a mimics后miR-NC组VSMC中miR-20a的表达明显升高,VEGF mRNA和蛋白表达明显上调,VSMC活性升高,VSMC迁移能力增强,差异均具有统计学意义(P<0.05).与miR-NC组比较,Con组以上各指标差异均无统计学意义(P>0.05).荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-20a可显著抑制野生型钙调蛋白1(CNN1)相对荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型CNN1相对荧光素酶活性无明显抑制作用(P>0.05).结论过表达miR-20a能够促进VSMC活性和迁移以及VEGF的表达,其作用机制可能与靶向调控CNN1的表达有关.