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不同生物活性基团修饰的纳米磁珠在核酸提取中的效能比较

Comparison of the effectiveness of nanomagnetic beads modified with different bioactive groups in nucleic acid extraction

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摘要目的评价不同生物活性基团修饰的纳米磁珠核酸提取效能,为临床应用及结果评价提供一些依据.方法通过不同生物活性基团修饰的纳米磁珠对检测乙型肝炎病毒的标本进行核酸提取,采用微量分光光度计(NanoDrop Onec)检测核酸的浓度及纯度,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测样本的CT值.结果在几种纳米磁珠提取法中,超顺磁性羧基纳米微粒提取的核酸浓度及纯度最高(浓度平均为953.3 IU/mL),其次是二氧化硅磁性微球与羧基微球混合纳米磁珠及纳米磁性氧化物MnFe2O4提取法.羟基修饰二氧化硅颗粒以及壳聚糖包覆的磁珠提取的核酸浓度较高,但纯度较差(A260/280及A260/230比值均超出标准范围).对于同一样本,超顺磁性羧基纳米微粒提取的核酸扩增CT值为(21.28±0.36),核酸提取效率明显高于离心柱提取法,且具有统计学意义.二氧化硅磁性微球和羧基微球混合纳米磁珠、羟基修饰二氧化硅纳米磁珠及壳聚糖包覆的纳米磁珠核酸提取效率均低于离心柱提取法.此外,超顺磁性羧基纳米微粒的提取时间可缩短至15分钟.结论超顺磁性羧基纳米微粒核酸提取效率、精密度及核酸产物纯度最高,有较大的临床应用价值.

作者 曲业敏 ^[1] 邵丽莹 ^[2] 袁晓燕 ^[2] 宋宇 ^[1] 丛海燕 ^[2] 国东 ^[2] 谢龙 ^[3] 迟翔宇 ^[4] 王明义 ^[1] 学术成果认领

作者单位 威海威高生物科技有限公司,山东,威海 264200;威海市立医院中心实验室,山东,威海 264200 ^[1] 威海市立医院中心实验室,山东,威海 264200 ^[2] 卫生部医药生物工程技术研究中心,临床医学分子诊断国家地方联合工程实验室,广东省核酸分子诊断工程技术研究中心,广东省临床医学分子诊断工程技术中心,广州达安基因股份有限公司,广东,广州,510665 ^[3] 威海威高生物科技有限公司,山东,威海 264200 ^[4]

关键词纳米磁珠实时荧光定量PCR 效能比较 Nano-magnetic beads Real-time fluorescent quantitative PCR Efficiency comparison

栏目名称

论著

DOI 10.3969/j.issn.1674-6929.2024.04.034

发布时间 2024-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

广东省重点领域研发计划项目（2019B110233003）