摘要目的 首次培养建立HPA永生化细胞系,并首次研制HPA基因分型国家参考盘.方法 筛选、招募、采集志愿者的新鲜外周血样本,经 E B病毒转化,培养建立HPA永生化细胞系.细胞扩大培养后提取HPA细胞系基因组gDNA,采用Qubit进行浓度检测、Nanodrop进行纯度质检,琼脂糖凝胶电泳分析基因组的完整性,将质检合格的gDNA浓度稀释至30 ng/μL,20 μL分装,组盘制备为HPA国家参考品盘,并进行复溶稳定性(-20℃和25℃之间反复冻融3次)和均匀性验证.结果 成功建立了27 株永生化HPA细胞系,提取的gDNA完整且纯度和均匀性良好,27例DNA样本冻融前后浓度无明显改变,相对偏差在±10.0%以内.结论 成功建立了HPA基因分型国家参考盘,为多种HPA基因分型检测试剂盒的质量评价提供了实物标准.
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