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中段尿样本病原菌快速检测方法的建立与评估

Establishment and evaluation of a rapid detection method for pathogens in midstream urine specimens

摘要目的 探讨建立和优化中段尿样本病原体快速检测方案,并对其临床运用的价值和检测效能进行评估.方法 收集2023年4月至2024年4月上海健康医学院附属嘉定区中心医院检验科中段尿样本1440例,分别采用直接梯度离心法、萃取液梯度离心法和分离胶离心法3种细菌富集方式(快检方案)以及孵育培养(标准方案)的4种方法进行前处理.采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS,简称MS)对经3种快检方案处理的中段尿样本进行不经培养的直接快速菌种鉴定并同标准方案报阳样本开展MS菌属种的鉴定,分别比较3种快检方案的总体检出率和在不同病原菌种类中检出率以及诊断特异性,并评估主要检出病原菌种的最低检出限.结果 1440例中段尿样本中,不同快检方案和标准方案的菌属种鉴定结果一致率均为100%.277例单一菌感染的阳性样本运用上述3种快检方案其检出率分别是 85.9%(238/277)、90.6%(251/277)、83.0%(230/277)且差异无统计学意义(P>0.05).61 例 2 种或以上菌混合感染的样本经上述 3 种快检方案鉴定出 1 种优势菌的检出率分别是73.8%(45/61)、77.0%(47/61)、70.5%(43/61)且差异无统计学意义(P>0.05).不同快检方案病原菌分类检出率比较中,革兰阳性菌分别为74.1%(63/85)、90.5%(77/85)、78.8%(67/85),萃取液梯度离心法占优势(P<0.05);革兰阴性菌分别为92.2%(190/206)、91.1%(188/206)、89.8%(185/206)且差异无统计学意义(P>0.05);真菌为 78.7%(37/47)、87.2%(41/47)、59.6%(28/47),萃取液梯度离心法占优势(P<0.05).在诊断特异性评估中,3种快检方案差异无统计学意义(P<0.05)且均有少量细菌数<105 cfu/mL(假阳性)的样本被快检方案检出.在最低检出限的评估中,同一病原菌使用不同集菌方式不存在差异;同一集菌方式对不同病原菌存在一定差异.结论 在MS检测平台上,通过对中段尿样本中的细菌富集能实现较高敏感性和特异性的快速检测.

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