换一批
换一批摘要目的:探讨BAI1基因在肝癌抗血管生成中的作用.方法:利用CRISPR/Cas9技术构建BAI1基因敲除的PLC/PRF/5细胞系.采用Sanger测序和蛋白质印迹法验证BAI1基因敲除结果.通过CCK8法检测BAI1基因敲除对肝癌细胞增殖的影响.将PLC/PRF/5细胞系与血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)共培养,检测BAI1基因对细胞成管能力的影响.构建裸鼠皮下移植瘤模型,在体内研究BAI1基因对肝癌生长和肿瘤血管生成的影响.结果:Sanger测序结果显示BAI1基因目的区域成功敲除,敲除后细胞系中BAI1蛋白表达缺失.BAI1基因敲除后PLC/PRF/5细胞增殖显著加快,与HUVEC共培养后细胞成管数量显著增多.BAI1基因过表达的Hep3B细胞在裸鼠体内生长速度减慢,肿瘤组织中CD31阳性表达降低.结论:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建BAI1基因敲除的PLC/PRF/5细胞系.BAI1基因可以抑制肝癌细胞的增殖和血管生成.
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