换一批黄粉虫纤溶活性基因的克隆及在毕赤酵母中的表达及活性检测
Cloning of Tenebrio Fibrinolyric Proteins gene and Expression in Pichia pastoris and Biological Activities Assay
摘要采用PCR技术,以含有TFP(Tenebrio Fibrinolyric Proteins, TFP) cDNA质粒作为模板,扩增出TFP基因片段.将克隆获得的目的基因插入到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,经测序无误后,获得重组表达质粒pPIC9K-TFP.将重组表达质粒线性化后电击转化到毕赤酵母GS115中,经筛选并PCR验证获得多拷贝整合型酵母工程菌,对工程菌进行发酵和甲醇诱导表达.阳性样品经纤溶平板实验验证,表明该表达蛋白具有生物活性.
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关键词
黄粉虫纤溶酶基因载体pPIC9K毕赤酵母表达及活性检测Tenebrio molitor L.fibrinolyric proteingenevector pPIC9KPichia pastoris GS115expression and biological activities assay
DOI
10.12052/gdutxb.160123
发布时间
2017-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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