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桉树林区水库致黑物鞣花酸对人源细胞的毒理效应研究

Research on the Toxic Effects on Human Cells of Natural Melanogenic Substance Ellagic Acid in Reservoirs of Eucalyptus Forest Area

摘要我国南方桉树林种植区里面的水库在秋冬季存在明显的天然致黑物质,主要为单宁酸、鞣花酸等多羟基酚类化合物及其铁盐络合物,中小型水库承担了农村生活饮用水源的功能,因此有必要评估天然致黑物质的毒性潜在风险.本文模拟南方桉树林区水库水体特有的天然致黑物,以不同浓度的鞣花酸(Ellagic acid,EA)和三价铁(Fe3+)为研究对象,评价暴露于EA和/或Fe3+对人源结直肠腺癌上皮细胞(DLD1)、肝细胞(LO2)和肾上皮细胞(293T)的一般细胞毒性、细胞内活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平和细胞形态变化,并确定不同质量浓度的EA和Fe3+的毒性作用特征.结果提示EA和Fe3+在单独暴露和联合暴露条件下表现出不同程度的细胞毒性.联合暴露时,DLD1在较高质量浓度的EA(1 mg/L,10 mg/L)联合1 μmol/L Fe3+处理组中细胞活力显著下降,比EA单独暴露时毒性更强.而LO2和293T在联合暴露组中细胞活力均未产生明显变化,但与Fe3+单独暴露相比联合暴露后细胞活力显著下降.氧化应激检测结果发现,与DMSO对照组相比,EA和/或Fe3+暴露均显著增加了ROS水平.其中,DLD1和LO2的ROS结果可能提示EA与Fe3+共同暴露比EA单独暴露时对细胞内ROS生成的影响更大,提高了氧化应激水平.此外,暴露于EA和/或Fe3+对3种细胞的细胞形态没有发现明显变化,但显著抑制了LO2中肌动蛋白F-actin的表达.结果表明,EA和Fe3+的单独或联合暴露对人源细胞具有较强的毒害作用,按影响程度从大到小排序,依次为:肝细胞LO2>肠道细胞DLD1>肾细胞293T.本文为南方农村水源地污染物的精准管控提供了基础依据.

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