换一批
换一批间接竞争酶联免疫分析法快速检测决明子中黄曲霉毒素B1的研究
Rapid Detection of Aflatoxin B1 in Semen Cassiae by Indirect Competitive Enzyme-linked Immunosorbent Assay
摘要目的:建立适用于中药决明子中黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)快速检测的间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA).方法:首先采用棋盘滴定法优化抗原抗体最佳浓度,建立抑制曲线,然后以显色值和灵敏度为评价指标筛选样品的提取和稀释方法.对所建立的方法进行方法学考察,最后用于实际样品检测.结果:经过优化,确定样品的最佳提取溶剂为乙腈-甲醇溶液(90∶10,v/v),稀释溶液为甲醇-PBS溶液(10∶90,v/v),稀释倍数为20倍.方法的半数抑制浓度为0.078 ng/mL,线性范围为0.016～0.25 ng/mL,回收率为85.00%～109.2%,RSD为0.45%～9.08%.采用所建立的方法对25批决明子进行了检测,经液相色谱-串联质谱法确证,超过限量标准的样品的假阳性率小于5%.结论:本文所建立的ic-ELISA灵敏、简便,适用于决明子中AFB1 的快速筛查,但仍存在一定的假阳性率,后续还需要对产生干扰的基质因素进行研究并消除,进一步提高检测的准确度.
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关键词
黄曲霉毒素B1间接竞争酶联免疫分析法样品前处理决明子一步稀释法aflatoxin B1indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assaysample preparationSemen Cassiaeone-step dilution method
分类号
R284.1
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-1865.2023.21.007
发布时间
2023-11-28
基金项目
国家自然科学基金（81903798）；
广东省普通高校特色创新类项目（2023KTSCX059）
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