换一批摘要通过PCR和免疫荧光技术实现生物素-链霉亲和素-异硫氰酸荧光素标记核酸,同时用0.1%(摩尔百分比)ATTO 647 DOPE标记LNP(SM-102∶DSPC∶Cholesterol∶PEG2000-DMG=50∶10∶38.5∶1.5,摩尔百分比),对制成的LNP-DNA制剂的理化性质及包封进行考察,并进行了体外细胞(Hela)实验,使用特异性抗体标记内涵体/溶酶体等内吞途径中相关囊泡,在倒置荧光显微镜或高内涵显微镜下考察LNP内吞过程及其在细胞内的转运情况.以GFP表达质粒作为递送货物,考察转染后绿色荧光蛋白表达效率.结果表明,祼DNA在被细胞内吞后,在细胞外周和表面形成内涵体颗粒且不会被进一步转运到细胞内.转染时间是影响LNP-DNA转染效率的主要因素之一,LNP-DNA通过内吞途径进入细胞,大部分被早期内涵体摄取形成LNP-DNA内涵体,随后转运至细胞核周围,部分转运至溶酶体,转运过程实现DNA的逃逸.
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关键词
脂质纳米颗粒细胞内吞生物素-链霉亲和素LNP追踪内涵体逃逸lipid nanoparticlesendocytosisbiotin-streptavidinlnp tracingendosomal escape
分类号
R94（药剂学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-1865.2024.020.029
发布时间
2024-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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