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黄瓜疫霉菌拮抗内生细菌的筛选与鉴定

Screening and Identification of Antagonistic Endophytic Bacteria Against Phytophthora drechsleri in cucumber

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摘要[目的]从黄瓜叶片中筛选抗疫霉菌效果好的内生细菌并进行鉴定,为进一步研究黄瓜疫病的理论探索及防治应用提供实验材料.[方法]以黄瓜叶片为实验材料筛选内生细菌,根据待检菌株的镜检特征、革兰氏染色反应、菌落排列方式和菌落形态特征等进行初步筛选.采用平板对峙法和发酵液拮抗法实验对目标内生细菌进行拮抗作用测定.通过16S rDNA序列测定及同源性分析,并构建系统发育树确定目标菌株种属.[结果]初步筛选出32株内生细菌将其编号为CL1～CL32,其中革兰氏阴性杆菌10株、革兰氏阳性杆菌13株、革兰氏阳性球菌9株,利用平板对峙法发现8株对掘氏疫霉菌有较强抑制作用的拮抗菌株,菌丝抑制率为10.3％～54.3％,抑菌半径为1～7 mm,对其中抑菌效果较好的3株菌株(CL7、CL9、CL15)进行发酵液拮抗实验,结果显示其抑菌率分别为54.4％、72.2％、63.3％.[结论]对掘氏疫霉菌具有较强抑制作用的3株内生细菌(CL7,CL9、CL15)分别属于泛菌属Pantoea sp.、假单胞菌属Pseudomonas sp.和葡萄球菌属Staphylococcus sp.,其中抑制效果最明显的为CL9,即假单胞菌属Pseudomonas sp..