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猪瘟病毒荧光定量RT—PCR检测方法的建立及其初步应用

Development and preliminary application of fluorescence quantitative RT- PCR for detection of classical swine fever virus

摘要针对CSFV基因组5'端非编码区序列设计并合成了高度特异的一对引物和一条探针,用于猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立。将提取的病毒的总RNA做为模板进行反转录和PCR,将PCR产物克隆到pMDl8-T载体后进行大肠杆菌转化,提取阳性质粒做为标准品绘制标准曲线,成功地建立了特异性检测CSFV的荧光定量RT-PCR方法,其灵敏度达到10。拷贝/μL。将猪瘟活疫苗(细胞源)采用不同剂量免疫猪后,取全血及组织,用所建立的方法进行检测,发现病毒主要分布在猪的血液、脾脏、淋巴结、扁桃体中。

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作者 夏芳 [1] 何玲 [1] 罗满林 [2] 陈瑞爱 [2] 学术成果认领
作者单位 广东大华农动物保健品股份有限公司,广东云浮,527400 [1] 广东大华农动物保健品股份有限公司,广东云浮527400/华南农业大学兽医学院,广东广州510642 [2]
分类号 S852.65
栏目名称
DOI 10.3969/j.issn.1005-8567.2011.05.012
发布时间 2012-04-21
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