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血清4型禽腺病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用

摘要根据多个GenBank登录的血清4型禽腺病毒株hexon基因序列,经多序列比对分析选取高度保守区域设计特异性引物探针,建立了检测FADV?4的TaqMan荧光定量PCR方法.该方法扩增产物长度为71 bp,在101~107 copies/μL范围内具有良好的线性关系,其扩增相关系数为0.995,初始模板最低检测下限为7.3×101 copies/μL质粒DNA,与常规PCR相比灵敏度高约1000倍.以H9亚型流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管病毒、传染性法氏囊病毒、网状内皮增生病毒、白血病病毒、减蛋综合征病毒、传染性贫血病毒核酸为模板时,均检测不到荧光信号,批内和批间重复性试验变异系数均不超过2%,具有良好的特异性和重复性.本文建立的方法可为FADV?4的早期感染诊断及定量分析提供有效技术手段.

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作者 招丽婵 [1] 王占新 [1] 罗洋洋 [1] 林欣 [1] 鲁俊鹏 [1] 学术成果认领
作者单位 广东温氏食品集团股份有限公司,广东省畜禽健康养殖与环境控制企业重点实验室,广东温氏食品集团股份有限公司研究院,广东云浮527400 [1]
分类号 S852.65+7
栏目名称
DOI 10.3969/j.issn.1005-8567.2020.05.014
发布时间 2020-10-30
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