换一批基于微载体的犬脂肪间充质干细胞三维悬浮培养体系的优化
Optimization Of A Microcarrier-based Three-Dimensional Suspension Culture System For Canine Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells
摘要为了提升犬脂肪间充质干细胞(cADMSCs)的扩增效率并解决传统二维培养体系规模化生产的局限性,试验采用基于SynthemaxⅡ微载体的三维悬浮培养技术,通过静态与动态培养策略优化接种密度、搅拌模式和培养周期等关键参数.研究通过静态培养对比不同接种密度(1×104、2×104、3×104 cells/cm2)对扩增效率和细胞活率的影响,采用台盼蓝染色计数活细胞并计算扩增倍数;动态培养中对比间歇搅拌与间歇-持续搅拌模式对细胞增殖的影响,利用转瓶生物反应器结合葡萄糖代谢监测评估扩增效果;通过荧光染色(Calcein-AM/PI、TRITC-鬼笔环肽/DAPI)检测细胞活性及形态特征,并分析不同培养周期(24-120 h)的细胞扩增趋势与活率变化.结果表明:静态培养下,接种密度为2×104 cells/cm2时扩增倍数达(7.20±0.20)倍,活细胞率为96.4%;动态培养采用间歇搅拌24h后转为持续搅拌72h的模式,在300 cm2微载体上实现4.1×104个细胞扩增,扩增倍数达(6.70±0.20)倍,活细胞率为94.0%;培养周期优化显示,96h为最佳培养时间,此时细胞形态完整且未出现聚集脱落,活率稳定在94.0%.说明基于微载体的三维悬浮培养体系通过优化接种密度、分阶段搅拌策略及培养周期,显著提升了cAD-MSCs的扩增效率与质量,为规模化生产提供了可行方案.
更多相关知识
关键词
间充质干细胞微载体三维培养动态搅拌细胞扩增Mesenchymal stem cellsMicrocarriersThree-dimensional cultureDynamic agitationCell expansion
分类号
Q813.1+1（细胞工程）
栏目名称
DOI
10.19978/j.cnki.xmsy.2025.05.07
发布时间
2025-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
- 浏览1
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
