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钙调素与重金属Pb~(2+)结合反应的方波极谱与循环伏安法研究

Direct Binding of Reaction Pb~(2+) to Calmodulin by Square Wave Polarography and Cyclic Voltametry

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摘要采用方波极谱法研究了重金属Pb~(2+)与钙调素(CaM)的结合反应, 直接检测到Pb~(2+)-CaM配合物的存在, 并进一步利用循环伏安法研究了Pb~(2+)-CaM的电极反应. 在pH=6.5时, 用方波极谱法在Pb~(2+)-CaM体系中检测出2个还原峰, 峰电位分别为-0.44～-0.47 V和-0.73～-0.77 V, 说明在Pb~(2+)-CaM体系中铅有2种存在形式, -0.44～-0.47 V的还原峰对应于游离态Pb~(2+), 电位更负的还原峰对应于配合物[Pb~(2+)-CaM]. 2个还原峰的峰电流均随着c_(Pb2+/cCaM) 比值增大而增大;至c_(Pb2+/cCaM)≥10后, 配合物[Pb~(2+)-CaM]的峰电流基本不再变化, 而游离态Pb~(2+)的峰电流则继续增大. 利用极谱滴定曲线的拐点可判断出Pb~(2+)在CaM中有10个结合位点. 进一步的测量结果表明, 循环伏安曲线出现游离态Pb~(2+)的氧化峰和还原峰, 而络合态的[Pb~(2+)-CaM]只有其还原峰, 反向电压扫描时不出现阳极波, 即没有相对应的氧化峰出现.