GFP标记胰岛及其在鼠体内不同部位移植的探索
Exploration of GFP labeled pancreatic islets and their transplantation in different sites of mice and rats
摘要目的 基于绿色荧光蛋白(GFP)标记胰岛,建立一种简便、精准探索胰岛在大小鼠不同部位移植存活效果的方法.方法 GFP腺病毒质粒转染标记分离鼠胰岛,将其移植到同系小鼠的腹腔、腹股沟皮下以及同系大鼠大网膜内,移植10 d后用便携式激发光源观察胰岛在移植部位的分布和存活情况,双硫腙(DTZ)染色液染色和倒置荧光显微镜确认胰岛,HE染色确认在移植位点的胰岛细胞团形态.结果 胰岛经感染复数为100的GFP腺病毒质粒转染后再培养48 h,在荧光显微镜和便携式激发光源照射下均可见胰岛发出绿色荧光;移植200个转染GFP质粒的胰岛至小鼠腹腔、腹股沟皮下以及大鼠肠系膜内10 d后,均可发现在移植部位有发绿色荧光的胰岛组织.以小鼠腹股沟皮下移植的胰岛为例,经DTZ染色可见组织中有显红色并能表达绿色荧光的胰岛组织,经HE染色可见胰岛外形圆整.结论 本研究建立了一种在动物体内探索胰岛移植存活的简便、精准方法,为初步判断该移植位点对于胰岛移植的适用性和后续进一步改进研究奠定了基础.
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