摘要目的建立实验犬心肌组织细胞核转录因子(NF-кB)快速提取及鉴定方法.方法采用液氮快速冷冻使犬心肌组织破碎,并优化核蛋白提取鉴定条件,参考哺乳动物鼠Igк轻链基因,设计可与犬心肌细胞核转录因子结合的序列,在不同的提取和标记条件下,通过凝胶阻滞分析NF-кB活性.结果两种提取及标记条件,凝胶阻滞分析结果有明显不同.按优化实验的方法提取和标记NF-кB,实验结果更为理想.结论优化提取条件后,提取犬心肌细胞NF-κB的方法简便、快速;设计的特异DNA探针可与犬心肌组织细胞NF-кB特异结合并显示良好的结合活性,为实验犬在急性事件时其心肌组织细胞NF-кB活性的研究提供了可行方法.
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