换一批
换一批稳定高表达MT－1E基因人肾小管上皮HK－2细胞株的构建
Construction of human renal tubular epithelial HK－2 cell line stably over－expressing MT－1 E gene
摘要目的 成功构建高表达金属硫蛋白MT－1 E基因的人肾小管上皮HK－2细胞株.方法 利用转染技术将测序鉴定后的质粒转染至HK－2细胞,使用嘌呤霉素筛选转染的HK－2细胞,荧光显微镜观察并记录,通过western blot技术对阴性对照细胞组和高表达MT－1 E组进行MT－1 E蛋白表达量鉴定.结果 转染后的质粒测序结果 包含MT－1 E基因序列,嘌呤霉素筛选最小致死浓度为4 μg/mL,高表达MT－1 E组蛋白相对表达量为2. 79 ±0. 16,与阴性对照细胞组比较,差异有统计学意义(t＝15. 89,P＝0. 016).结论 本研究完成高表达MT－1 E基因的HK－2细胞株构建,可用于后续相关分子生物学实验.
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