布比卡因和罗哌卡因对脐静脉造血干细胞的功能影响
Effects of bupivacaine and ropivacaine on the functional properties of human umbilical vein-derived hematopoi-etic stem cells
摘要目的 探讨临床常用局部麻醉药布比卡因和罗哌卡因对新生儿脐带血CD34+CD133+造血干细胞生物学功能的影响,为干细胞采集及储存过程中麻醉药使用的安全性评估提供实验依据.方法 采集足月顺产新生儿脐带血,通过Ficoll密度梯度离心和免疫磁珠分选技术获得高纯度CD34+CD133+造血干细胞.分别给予不同浓度(0.1、0.5、1 mmol/L)的布比卡因和罗哌卡因处理,采用CCK-8法检测细胞活性,An-nexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,荧光探针法联合流式细胞术检测细胞内一氧化氮(NO)水平,甲基纤维素集落培养分析造血潜能,Transwell实验评价细胞迁移能力.结果 与对照组比较,布比卡因对造血干细胞的细胞活性(P=0.027)、凋亡(P=0.008)、NO水平(P=0.002)、集落形成及迁移能力(P=0.006)均表现出显著的剂量依赖性抑制作用,在高浓度下尤其明显.罗哌卡因在多数浓度下对细胞功能影响较小,除在高浓度时对部分指标产生轻度抑制外,未表现出明确的剂量依赖关系,整体毒性作用相对温和.凋亡及NO结果提示,布比卡因可能通过诱导氧化应激促进细胞凋亡.结论 布比卡因对新生儿脐带血CD34+CD133+造血干细胞具有剂量依赖性毒性,而罗哌卡因在本实验浓度范围内相对安全.在分娩麻醉过程中,临床应优先选择罗哌卡因等毒性较低的局麻药,以保障脐带血干细胞的质量与后续应用价值.
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