换一批
换一批靶向IGFBP7慢病毒载体遏制恶性黑素瘤的实验研究
Experimental study of slow virus vector targeting IGFBP7 inhibited malignant melanoma
摘要目的 构建靶向IGFBP7的LV5病毒表达载体,并检测其表达效能及在黑素瘤细胞系中促凋亡的作用.方法 以人igfbp7基因序列作为模版合成编码核酸序列,通过限制性内切酶Not Ⅰ和Nsi Ⅰ酶切、T4 DNA连接酶连接,将igfbp7插入LV5-GFP,构建靶向IGFBP7的慢病毒质粒表达载体,筛选阳性克隆后与包装质粒通过脂质体共转染SK-MEL-28人黑素瘤细胞株,对照组转染LV5空载体.病毒感染SK-MEL-28,采用荧光显微镜观察感染的效率,Realtime PCR检测igfbp7mRNA的表达,流式细胞术检测对照组及处理组细胞凋亡率.统计数据分析LV5-NC-IGFBP7促黑素瘤凋亡的效能.结果 成功构建LV5-NC-IGFBP7,病毒转染后测定其滴度为1x109 UT/mL,细胞感染率在80％以上,RealtimePCR检测表明处理组igfbp7 mRNA表达高于对照组(P＜0.01),但对照组及处理组凋亡率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 靶向IGFBP7的LV5-NC-IGFBP7病毒载体能有效促进igfbp7 mRNA高表达,但促恶性黑素瘤凋亡的效能有待提高.
更多相关知识
主题词
病毒(Viruses)肿瘤(Neoplasms)研究(Research)胰岛素样生长因子结合蛋白质类(Insulin-Like Growth Factor Binding Proteins)对照组(Control Groups)
分类号
R729.5
栏目名称
基础研究
DOI
10.3969/j.issn.1005-4057.2015.01.007
发布时间
2016-05-20
基金项目
国家自然科学基金青年项目(No.81102066,广东省自然科学基金博士启动项目
广东省医学科研基金项目
- 浏览58
- 被引1
- 下载4
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
