对辣椒素通过MAP1S介导自噬减缓大鼠硬膜外纤维化的效果观察

Effect observation of capsaicin mediates autophagy via MAP1S to decelerate rats epidural fibrosis

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摘要目的探究局部应用辣椒素(Cap)对大鼠椎板切除术后硬膜外纤维化(EF)的效果.方法选取48只8周龄、体重260～320 g的雄性SD大鼠,随机分为假手术组、生理盐水对照组和辣椒素处理组(5 mg/ml和10 mg/ml).对生理盐水对照组,辣椒素处理组大鼠行椎板切除术.假手术组仅暴露硬脊膜,不行椎板切除术.术前术后通过Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)运动评分评估大鼠的关节活动、躯干运动及协调情况.术后1个月,通过大体观察、HE染色、免疫组织化(IHC)、Masson染色和天狼猩红染色评估EF程度.运用串联质谱标签(TMT)蛋白定量组学技术、qRT-PCR和组织免疫荧光染色检测微管相关蛋白1S(MAP1S)、自噬相关蛋白(ATG9A)、纤维连接蛋白(FN1)、肌动蛋白(ACTA2)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)等基因表达水平.结果所有组别大鼠手术前后的BBB评分差异无统计学意义,表明手术和Cap无显著运动功能损害.宏观和组织学分析显示,Cap显著减缓了EF发生,抑制硬膜外细胞增殖,且效果与浓度相关.Masson和天狼猩红染色证实Cap减少了Ⅰ型胶原纤维沉积.TMT蛋白定量和qRT-PCR分析揭示,Cap上调了MAP1S和ATG9A表达,下调了FN1和ACTA2表达.免疫荧光染色显示,Cap处理后MAP1S和LC3B表达显著增加.结论 Cap通过激活MAP1S介导的自噬途径,有效抑制硬膜外区域细胞增殖和胶原纤维沉积,从而减缓EF进展.