蛋白酶活化受体1调控Mcl-1和Bax表达介导热打击致人脐静脉内皮细胞早期凋亡的研究

Early apoptosis of human umbilical vein endothelial cells resulting from heat stress mediated by protease-activated receptor 1 through regulating the expressions of Mcl-1 and Bax

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摘要目的:观察热打击人脐静脉内皮细胞(HUVECs)后蛋白酶活化受体1(PAR1)对凋亡相关蛋白Mcl-1、Bax水平表达调控及细胞早期凋亡的影响,明确PAR1在热打击致HUVECs凋亡中的作用.方法:采用PAR1抑制剂SCH79797 (SCH)、PAR1激动剂TFLLR-NH2(TF)、PAR1 siRNA、PAR1腺病毒过表达预处理HUVECs,给予42℃热打击2h,后于8h提取各处理组总蛋白,western blot检测Mcl-1、Bax、Caspase 3及Cleaved-Caspase 3蛋白表达,流式细胞计数仪检测各处理组细胞早期凋亡.结果:与正常对照组比较,热打击组Mcl-1、Bax、Caspase 3表达增加及Cleaved-Caspase 3活化程度增加(P＜0.05);与热打击组比较,PAR1抑制剂或PARl siRNA联合热打击组Mcl-1表达增加(P＜0.05),Bax减少(P＜0.05),Cleaved-Caspase 3活化程度降低,细胞早期凋亡数目减少(P＜0.05,P＜0.01),PAR1激动剂或PAR1腺病毒联合热打击组Bax表达增加(P＜0.05),Mc1-1表达减少(P＜0.05),Cleaved-Caspase 3活化程度增加,且细胞早期凋亡数目增加(P＜0.05或P＜0.01).结论:热打击HUVECs可发生细胞凋亡,Mcl-1、Bax蛋白表达增加;PAR1通过调控Mcl-1及Bax的表达最终起到促凋亡作用.

作者王郑莲 ^[1] 徐秋林 ^[2] 刘亚楠 ^[2] 周耿标 ^[3] 刘云松 ^[2] 邱俊明 ^[2] 苏磊 ^[2] 学术成果认领

作者单位广州军区广州总医院重症医学科,全军热区创伤救治与组织修复重点实验室,广东广州510010;广州中医药大学,广东广州510403 ^[1] 广州军区广州总医院重症医学科,全军热区创伤救治与组织修复重点实验室,广东广州510010 ^[2] 广东省中医院芳村医院重症医学科,广东广州,510000 ^[3]

关键词热打击人脐静脉内皮细胞细胞凋亡蛋白酶活化受体1 Mcl-1 Bax Heat sress Human umbilical vein endothelial cells Apoptosis Protease-activated receptor 1 Mcl-1 Bax

主题词热温度(Hot Temperature)受体, PAR-1(Receptor, PAR-1)人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells)细胞凋亡(Apoptosis)研究(Research)

栏目名称论著

DOI 10.3969/j.issn.1672-8521.2016.02.001

发布时间 2016-11-07

基金项目

广东省自然科学基金博士启动项目 中国博士后科学基金