摘要目的:以核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2 related factor2,Nrf2)/血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)信号通路调控线粒体融合蛋白-1(mitofusin-1,Mfn1)和线粒体融合蛋白-2(mitofusin-1,Mfn2)为研究切入点,探讨溃结宁膏穴位敷贴对"虚""瘀"状态下溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠氧化应激损伤的保护作用及其潜在作用机制.方法:将51只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组(10只)与造模组(41只).造模组大鼠采用腺嘌呤+冰番泻叶分阶段灌胃以及2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)/乙醇法制备"虚""瘀"状态下UC大鼠模型.待造模成功后,造模组大鼠再次随机分为模型组、非穴位敷贴组、穴位敷贴组、柳氮磺吡啶组并给予不同的干预方法.正常对照组、模型组给予无药物的巴布剂基质穴位敷贴;穴位敷贴组给予溃结宁膏穴位敷贴"足三里""天枢""肾俞""膈俞";非穴位敷贴组给予溃结宁膏穴位敷贴于臀部肌肉丰厚处;柳氮磺吡啶组给予无药物的巴布剂基质穴位敷贴加柳氮磺吡啶溶液灌胃,其余各组给予等量生理盐水灌胃,每日1次,连续干预28天.观察各组大鼠的死亡情况、宏观表征,评估结肠组织肉眼损伤评分与病理损伤评分;运用荧光定量PCR技术检测大鼠结肠组织Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein-1,Keap1)、Nrf2、Mfnl、Mfn2 mRNA的表达水平;采用蛋白免疫印迹法(western blot,WB)检测大鼠结肠组织中keap1、Nrf2、HO-1蛋白的表达情况.结果:与正常对照组相比,模型组大鼠结肠组织肉眼损伤评分与病理损伤评分升高(P＜0.01),Keap1蛋白及mRNA表达升高(P＜0.01),Nrf2蛋白及mRNA、Mfnl mRNA、Mfn2 mRNA、HO-1蛋白表达明显降低(P＜0.05);与模型组相比,穴位敷贴组、柳氮磺吡啶组大鼠结肠组织肉眼损伤评分与病理损伤评分降低(P＜0.01),Keap1蛋白及mRNA表达下调(P＜0.01),Nrf2蛋白及mRNA、Mfnl mRNA、Mfn2 mRNA、HO-1蛋白表达升高(P＜0.05),非穴位敷贴组上述指标变化无统计学意义;与非穴位敷贴组相比,穴位敷贴组大鼠结肠组织肉眼损伤评分与病理损伤评分降低(P＜0.01),Keap1蛋白及mRNA表达水平降低(P＜0.01),Nrf2蛋白及mRNA、Mfnl mRNA、Mfn2 mRNA、HO-1蛋白表达水平升高(P＜0.05);穴位敷贴组和柳氮磺吡啶组各指标差异无统计学意义.结论:溃结宁膏穴位敷贴可通过激活Nrf2/HO-1信号通路,上调Mfnl、Mfn2 mRNA表达水平,改善线粒体损伤,从而发挥对UC大鼠氧化应激损伤的保护作用.