一种用于人碱性成纤维细胞生长因子等电点测定的方法
A Method for Determining the Isoelectric Point of Human Basic Fibroblast Growth Factor
摘要目的 建立一种用于检验人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)理化检验的等电点聚焦电泳(IEF)分析方法.方法 通过对比不同IEF法试验条件筛选针对hbFGF蛋白的等电点测定的最优方法,并对该方法的专属性、精密度及耐用性进行方法验证.结果 两性电解质Bio-Lyte与Ampholyte(2∶1)体系为最优;PBS缓冲液不干扰该法;重复性的平均pI值为10.0,RSD为0.82(≤3.0%);中间精密度的平均pI值为10.0,总RSD为0.98%(≤6.0%);耐用性不同电压(460、480、500 V)的平均pI值为10.0,RSD为1.3%(≤3.0%);耐用性不同电泳时长(70 min、90 min、110 min)的平均pI值为10.0,RSD为2.0%(≤3.0%).结论 所建立的用于检测hbFGF蛋白等电点的IEF电泳法准确耐用,专属性强,稳定性高,可用于日常hbFGF蛋白的等电点检测.
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