换一批
换一批SARS冠状病毒S蛋白多价核酸疫苗的构建和免疫学原性
Immune characteristics of plasmid DNA and cloning of S gene conservative fragments in severe acute respiratory syndrome coronavirus
摘要目的构建以SARS冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)S蛋白3个保守片段基因的组合为抗原基因DNA疫苗,采用肌肉注射的方法接种小鼠后观察机体产生免疫应答的情况.方法将人工合成的S蛋白3个保守片段基因组合(称为Sa)克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),随之将重组质粒进行小鼠肌肉免疫,定期检测血清中抗SARS-CoV的病毒特异性抗体水平,流式细胞仪观察其淋巴细胞表型变化,PCR法检测质粒分布,免疫组化检测抗原表达.结果疫苗注射后15 d就能在血清中检测出病毒特异性抗体,并且疫苗能在机体中持续表达抗原引发机体持续的免疫应答,直到注射后45 d免疫应答都不见减弱;以CTL T淋巴细胞为主的CD8+T淋巴细胞的百分比含量增加极显著,引起强大的体液免疫和细胞免疫;而空载体质粒对照组未检测出明显的特异性免疫应答.结论以S蛋白3个保守片段基因组合为抗原基因的DNA疫苗通过肌注能诱导小鼠针对SARS病毒强大的免疫应答.
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