换一批龟甲配方颗粒的高分辨熔解曲线技术鉴别研究
Study on the identification of Testudinis Carapax et Plastrum Formula Granule by high-resolution melt-ing curve analysis
摘要目的 建立一种龟甲配方颗粒高分辨熔解曲线(HRM)技术鉴别方法.方法 根据乌龟Chinemys reevesii及其混伪品的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome oxidase subunitⅠ,COI)基因序列上的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点设计鉴别引物,扩增产物直接进行HRM分析,并优化反应体系,根据最佳条件进行适用性验证.结果 在模板DNA质量浓度为0.62～374.88 ng/μL、引物浓度为0.1～0.4 μmol/L、退火温度为62℃、循环数为45个的条件下,龟甲饮片和配方颗粒的熔解曲线为单峰,其Tm均值分别为(82.39±0.09)、(82.38±0.05)℃,而混伪品和醋龟甲配方颗粒未有扩增.结论 该研究建立的高分辨熔解曲线鉴别方法可快速鉴别龟甲原料和配方颗粒的真伪,以及区分其生品和炮制品配方颗粒,为龟甲配方颗粒的质量标准研究提供了理论依据.
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关键词
龟甲配方颗粒高分辨熔解曲线(HRM)分子鉴定Testudinis Carapax et PlastrumFormula Granulehigh-resolution melting curvemolecular identification
分类号
R284.1（中药学）
栏目名称
DOI
10.16809/j.cnki.2096-3653.2024030401
发布时间
2024-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
工业和信息化部产业技术基础公共服务平台项目（2022-230-221）
佛山市南海区重点领域科技攻关专项
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