补阳还五汤质量评价及其活性成分羟基红花黄色素A对内皮细胞损伤保护作用的研究
Quality evaluation of Buyang Huanwu Decoction and the protective effect of hydroxy-safflower yellow A on endothelial cell injury
摘要目的 建立同时测定补阳还五汤中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、羟基红花黄色素A、芍药苷、苦杏仁苷5种成分的高效液相色谱(HPLC)分析方法,并研究羟基红花黄色素A对内皮细胞损伤的作用.方法 采用HPLC法对补阳还五汤中的5种成分进行质量分数测定及方法学考察.细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK8)法检测羟基红花黄色素A不同浓度对EA.hy926细胞的细胞毒性;qRT-PCR法检测羟基红花黄色素A对TNF-a诱导的EA.hy926细胞损伤中TF、IL-6、IL-1β、MCP-1的mRNA水平.结果 5种成分线性关系均良好,相关系数(R2)均在0.995 0以上;平均加样回收率在93.80%~101.48%之间,RSD均小于3%,表明方法准确度良好;5种成分质量分数的RSD值在1.78%~2.59%之间.TNF-a(10 ng/mL)刺激EA.hy926细胞后,TF、IL-6、IL-1β、MCP-1的mRNA水平显著升高(P<0.05),而羟基红花黄色素A干预后呈浓度依赖性下调(P<0.05).结论 该方法专属性强、重复性好,稳定、可控,可为补阳还五汤的质量评价提供参考.其活性成分羟基红花黄色素A可改善TNF-a诱导的Ey.hA926内皮细胞损伤,为阐明补其药效物质基础提供参考.
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